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PeproTech-ELISA試劑盒常見問題匯總

發布時間:2017-08-15

1. PeproTech的一個ELISA試劑盒(EDK)能檢測多少塊板?

一個標準ELISA試劑盒所含組分足夠檢測10塊96孔板,而一塊Mini ELISA試劑盒所含組分足夠檢測2塊96塊。

2. PeproTech ELISA試劑盒中所含的HRP結合物的穩定性如何?

ABTS ELISA試劑盒中的Avidin-HRP 在2-8℃最多穩定一個月,分裝并凍存于-20℃以下則可最長穩定2年,避免反復凍融。TMB ELISA試劑盒中的鏈霉親和素-HRP可以在2-8℃中穩定半年。

3. 如何獲得試劑盒的交叉反應信息?

PeproTech在實驗室內自行測試了其ELISA試劑盒的交叉反應性,可在說明書中查看測試結果。

4. ELISA實驗過程中如果想周末停一下怎么辦?

可以在周五用包被抗體包板,然后放4℃保存,下周一再繼續實驗,請注意:抗體包被時間的改變可能會引起板間結果的差異。

5. PeproTech的EDK是否適用于所有類型的樣本?

雖然PeproTech沒有用其試劑盒對每種樣本進行測試,但這些試劑盒應該適用于(但不僅限于)以下標本:血清、血漿、細胞培養上清、尿液和唾液。

6. 顯色反應需要終止嗎?

Avidin-HRP和底物ABTS的顯色反應是不需要終止的,當標準品的零孔OD值小于0.2,或最高濃度孔OD值小于1.2時,通??梢垣@得可靠的標準曲線,如要終止顯色反應,可以用1%SDS作為終止液。雖然資料顯示SDS是ABTS的最適終止液,但PeproTech并未在實驗室中使用終止液。

7. PeproTech的ABTS EDK可以用TMB作為底物嗎?

PeproTech的EDK是用ABTS進行優化的,因此最好使用ABTS作為底物,這些試劑盒也與TMB配合使用,但需要做一些調整:

? 試劑盒中的Avidin-HRP不能與TMB配對,必須另購鏈霉親和素-HRP;

? 鏈霉親和素-HRP的工作濃度需要優化;

? 使用鏈霉親和素-HRP和TMB時,通常需用終止液,請按照說明書操作;

? 加終止液前,TMB的反應時間需要優化;

? 使用推薦的酶標板,并在450nm讀取吸光值,校正波長為650nm。

8. EDK組分中為什么要添加D-甘露醇?

在EDK組分中加入D-甘露糖的目的是使蛋白/抗體可見,這不會影響ELISA的檢測結果。

9. 是否可以將EDK說明書中的曲線作為我的標準曲線?

每塊ELISA板必須單獨做標準曲線,也就是說,一塊板的標準曲線不能用于另一塊板,PeproTech的EDK說明書中提供的標曲是在自己的實驗室中做出來的,僅可用作示例。

10. PeproTech的標準曲線是如何生成的?

在實驗室中做ELISA時,PeproTech會用Molecular Devices公司的酶標儀讀取吸光值,然后用SOFTmax PRO軟件進行結果分析,該軟件能將獲取的數據進行四參數曲線擬合。


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